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31º Congresso Brasileiro de Cosmetologia, São Paulo, 22-24 Maio 2018 Andréia Feital da Costa Pereira, Maurizio Mercuri, Sheila Gomes da Silva, Amanda Francielli Pereira, Giulia Okamoto Maciente, Ana Lúcia Tabarini Alves Pinheiro, Michelle Sabrina da Silva, Gustavo Facchini, Samara Eberlin. A busca por substâncias que possam retardar ou reverter o processo de envelhecimento cutâneo é uma ferramenta constante de pesquisa e desenvolvimento na área cosmética e dermatológica. Um evento inevitável no processo de envelhecimento é a diminuição na síntese das principais proteínas dérmicas, colágeno e elastina, além do fator de crescimento TGF-β (fator transformador do crescimento beta), essenciais para a sustentação do tecido. A mensuração de parâmetros como a produção de colágeno utilizando modelos experimentais de cultura de células ou pele humana pode ser uma ferramenta útil para avaliação da eficácia de produtos e ativos cosméticos com apelo de antienvelhecimento, antirrugas, restauração e manutenção da sustentação do tecido conectivo. Neste trabalho, culturas de pele humana foram tratadas com o produto teste UrMk por 48 horas para avaliação da síntese de pró-colágeno tipo I através da técnica de imunofluorescência e quantificação de colágeno total no sobrenadante das culturas. De acordo com os resultados apresentados, podemos concluir que o produto teste UrMk aumentou significativamente a produção de colágeno total em 71,28% e a densidade de pró-colágeno tipo I em 40,13%, quando comparado ao grupo controle. Os resultados obtidos nos permitem inferir que o produto teste UrMk exerce um efeito positivo na proteção da pele contra o envelhecimento através do aumento da produção de colágeno total e pró-colágeno tipo I, reduzindo a formação de rugas e aumentando a sustentação tecidual.

XX Congresso Brasileiro de Toxicologia, Goiânia, 08-11 Outubro 2017 Silva, MS; Facchini, G; Pinheiro, ALTA; Pinheiro, AS; Eberlin, S; Picon, FC; Eberlin, S. Actives used in the treatment of dermatoses act on deeper tissues of the skin, making it necessary to permeate the stratum corneum. On the other hand, skin permeation is undesirable in some products, such as sunscreens and repellents, constituting an important parameter indicative of product safety. The FTIR technique is based on the principle of IR absorption by the active, resulting in characteristic vibrational movements in the molecule. In this sense, the use of FTIR is a useful tool in dermal safety assessments, where the objective is that the active does not permeate the stratum corneum (SC), and in evaluations of topical efficacy with the objective of skin permeation. The aim of this study was to evaluate the skin permeation of topical products through FTIR-ATR using ex vivo skin fragments from elective plastic surgery. Icaridine and caffeine spectra were measured using the IR spectrophotometer with an ATR cell and ZnSe crystal. The baseline spectra of skin fragments, actives (Icaridine/caffeine), and products were obtained. The formulations containing each active were applied to the skin (2 mg/cm 2 ). Spectrum measurements were obtained 1 hour (t1) after application for Icaridine and 24 hours (T24) after application for Caffeine. Afterward, 50 tape-stripping procedures were performed for SC removal, and new spectral readings were taken. The spectra obtained demonstrated the presence of the active on the surface of the skin at t1 and t24. After the 50 tape-stripping process, we observed the absence of monitoring bands for Icaridine, which is an active used in repellents, confirming the absence of permeability in the SC. For assessments of caffeine, an active ingredient commonly used in cosmetic products that accelerate the lipolysis process, we observed the presence of the monitoring bands even after removal of the SC by the tape-stripping technique, confirming its skin permeation ability. According to the results obtained, we can conclude that the use of the FTIR-ATR method together with the tape-stripping technique using human skin fragments for the identification of active skin permeation is a promising tool in safety and efficacy trials of cosmetic and dermatological products.

26th EADV (European Academy of Dermatology and Venereology) Congress, Geneva, Switzerland, 13-17 September 2017. Torloni LBO, Vanzo-Jr AC, Pereira AFC, Lage R, Mercuri M, Silva SG, Satake CY, Maciente GO, Pereira AF, Silva MS, Facchini G, Pinheiro ALTA, Eberlin S. Keratinocytes undergo numerous biochemical reactions during the transition from the basal layer to the stratum corneum (SC), including the synthesis of specific basal (K14) and suprabasal (K10) keratins and cornified envelope-associated proteins. The epidermal differentiation complex (EDC) is constituted through cross-linking of involucrin, loricrin, profilaggrin, among others, on the intracellular surface of the plasma membrane in the upper spinous and granular layers of the epidermis 1-3 . Studies have shown that many factors, such as skin inflammatory processes and prolonged exposure to sunlight, can affect the skin barrier and extracellular matrix, inducing a decrease in the synthesis of the major dermal proteins, collagen and elastin, clinically characterized by wrinkles, rough skin, and loss of water and skin tone 4 . In this study, we evaluated the effects of a cosmetic formulation on the production of aquaporin-3, envelope proteins filaggrin, involucrin, keratin 10 and 14, and extracellular matrix collagen type I and III using an in vitro and ex vivo model of human skin. Human fibroblasts and keratinocytes were incubated with the cosmetic formulation (GLYd) for further quantification of aquaporin-3, filaggrin, involucrin, keratin 10, keratin 14, collagen type I and III. Human fibroblasts were additionally subjected to oxidative stress by UV radiation to mimic skin aging. Cell supernatants and lysates were collected, and mediators were quantified using a colorimetric sandwich assay (ELISA). Fragments of human skin, from elective plastic surgery, were treated with GLYd and forwarded to immunohistochemistry evaluation for involucrin, keratin 10, and keratin 14. ANOVA followed by the Bonferroni test was used to compare data among all groups. Our results demonstrated that incubation of keratinocyte cultures with GLYd increased levels of aquaporin-3, filaggrin, involucrin, keratin 10, and keratin 14, reaching up to 2.80, 1.92, 2.20, 2.16, and 2.14-fold increase, respectively, in relation to the non-treated control. The effects of GLYd were also confirmed by the immunohistochemical evaluation of involucrin, keratin 10, and keratin 14 in human skin culture. GLYd treatment was able to protect fibroblast cultures against significant reduction in the synthesis of collagen types I and III, induced by UV radiation. The results obtained allow us to infer that GLYd exerts an effect on skin hydration and renewal by increasing the production of aquaporin-3, involucrin, filaggrin, keratins 10 and 14, besides playing a role in skin protection by preventing the reduction of type I and type III collagen production induced by exposure to UV radiation.

Journal of the American Academy of Dermatology, 76(6) Supplement 1, AB201, 2017. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.jaad.2017.04.786 Antonio C. Vanzo, Jr, Liliana B. O. Torloni, Renan Lage, Andréia FC Pereira, Maurizio Mercuri, Amanda F. Pereira, Michelle S. Silva, Gustavo Facchini, Samara Eberlin. The nails are structures formed by keratinized squamous cells produced by the matrix that grow on the nail bed. The hardness of the nail plate and its adherence to the underlying bed are key properties that make them protective appendages due to the presence of different types of keratins. Studies have shown the presence of K10 and K14 throughout the stratified epithelium of the nail unit. In this context, filaggrin has the role of stabilizing the network of intermediate filaments of K6 and K16 in hyperproliferative stages and promoting increased epidermal cohesion. With the purpose of maintaining the health of nails and improving their appearance, the cosmeceutical market studies new strengthening and fortifying formulations that may influence their biological function. Based on the above, the present study evaluates the efficacy of a nail care cosmetic product (NCCP) through preclinical studies in strengthening and repair activity. Human keratinocytes (HaCat) were incubated with three non-cytotoxic concentrations of NCCP for 48 hours for further evaluation of the production of keratins 1, 10, 14, 16, 17, and filaggrin. The in vitro results show that NCCP has a strengthening and repair effect on nails by stimulating the production of filaggrin and keratins 1, 10, 14, 16, and 17 in human keratinocytes, favoring the nail plate hardness and its adherence to the underlying bed.

Journal of the American Academy of Dermatology, 76(6) Supplement 1, AB206, 2017. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.jaad.2017.04.804 Antônio C. Vanzo, Jr, Liliana B.C. Torloni, Renan Lage, Andréia FC Pereira, Sheila G Silva, Amanda F Pereira, Michelle S Silva, Gustavo Facchini, Samara Eberlin. Extrinsic aging is attributed to changes in the skin being influenced mainly by ultraviolet radiation (UV). After exposure to UV-A and UV-B, the formation of free radicals occurs, causing damage to cells and triggering an inflammatory response. The cellular redox homeostasis mechanism facilitates the elimination of free radicals through the antioxidant enzymes catalase, superoxide dismutase, and glutathione reductase. The oxidative process leads to decreased synthesis of collagen, elastin, glycosaminoglycans (GAGs), and TGF-β (transforming growth factor beta), which are essential to support the tissue. This decrease, associated with increased proteolytic enzymes such as matrix metalloproteinases (MMPs), leads to a breakdown of the extracellular matrix and premature signs of photoaging. Furthermore, prolonged exposure of human skin to UV radiation can result in erythema and edema formation due to induction of the inflammatory response as a consequence of the release of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and vascular endothelial growth factor (VEGF). In this study, we evaluated the preclinical effectiveness of a new active complex composed of vitamin C nanospheres in the photoaging process using human cultured cells. Fibroblasts and keratinocytes were incubated with three non-cytotoxic concentrations of the new active complex with vitamin C nanospheres and subjected to UV radiation for later quantification of mediators involved in photoaging. Our results showed that the new active complex with vitamin C nanospheres prevents a significant decrease in the levels of collagen, elastin, GAG, TIMP-1, and TIMP-2, which are produced by cells exposed to UV radiation, and protects against UV-induced MMP-1, MMP-9, and MMP-13. Furthermore, the new active complex with vitamin C nanospheres preserves the consumption of superoxide dismutase and prevents the induction of iNOS and VEGF synthesis. These results allow us to infer that the new active complex composed of vitamin C nanospheres has a beneficial effect in preventing the deleterious effects of UV radiation through mechanisms involving restoration and tissue regeneration, antioxidant activity, and reducing local vasodilation.

Journal of Cosmetic Dermatology, 2017; 1-9 DOI: 10.1111/jocd.12349 Gustavo Facchini, Samara Eberlin, Stefano Piatto Clerici, Ana Lucia Alves Tabarini Pinheiro, Adilson Costa. Unwanted side effects such as dryness, hypersensitivity, and cutaneous photosensitivity are challenges for adherence and therapeutic success for patients using treatments for inflammatory and allergic skin response. In this study, we compared the effects of two dermatological formulations, which are used in inflammatory and/or allergic skin conditions: dexchlorpheniramine maleate (DCP; 10 mg/g) and promethazine (PTZ; 20 mg/g). Methods: We evaluated both formulations for phototoxicity potential, skin irritation, anti-inflammatory and antihistaminic abilities, and skin barrier repair in vitro and ex vivo using the standard OECD test guideline n° 432, the ECVAM protocol n° 78, and cultured skin explants from a healthy patient. Ultraviolet A was chosen as the exogenous agent to induce allergic and inflammatory response. Both PTZ and DCP promoted increases in interleukin-1 (IL-1) synthesis in response to ultraviolet A (UVA) radiation compared to the control. However, the increase observed with PTZ was significantly greater than with DCP, indicating that the latter has a lower irritant potential. DCP also demonstrated a protective effect on UVA-induced leukotriene B4 and nuclear factor kappa B (NF-κB) synthesis. Conversely, PTZ demonstrates more robust UVA antihistaminic activity. Likewise, PTZ promoted a significantly greater increase in the production of involucrin and keratin 14, both associated with protective skin barrier properties. Conclusion: In conclusion, these data suggest possible diverging UVA response mechanisms of DCP and PTZ, which provides greater insight into the contrasting photosensitizing potential between DCP and PTZ observed in patients.

Journal of the American Academy of Dermatology, 76(6) Supplement 1, AB197, 2017. DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.jaad.2017.04.769 Antonio C. Vanzo, Jr, Liliana B. O. Torloni, Renan Lage, Andréia F. C. Pereira, Maurizio Mercuri, Amanda Francielli Pereira, Michelle Sabrina da Silva, Gustavo Facchini, Samara Eberlin. Extrinsic cutaneous aging is attributed to changes in the skin due to lifestyle, being influenced mainly by ultraviolet radiation (UV), but also by pollution resulting from smoking, chemicals, heat, and other environmental insults. After exposure to UV radiation, the formation of free radicals occurs, causing damage to cells and triggering an inflammatory response. In addition, cigarette smoke exerts harmful effects on the skin mediated by the AhR receptor (aryl hydrocarbon receptor), a cytosolic transcription factor found in an inactive form, which binds to the toxic agent and translocates to the cell nucleus, where it regulates the transcription of genes involved in oxidative stress, inflammation, immunosuppression, pigmentation, premature aging, and skin cancer. In this sense, the search for substances that can reduce or reverse the skin aging process is a constant tool of research and development in cosmetics and dermatology. A strategy for the development of a more robust product capable of preventing oxidative stress involves the use of antioxidants to prevent redox imbalance and maintain cellular homeostasis, containing the progression of chain reactions that oxidize organic substrates. The objective of this study was to evaluate the preclinical efficacy of an antioxidant skin care product (nano-tocopherols+resveratrol; nano-omegas 3, 6, and 9; standardized complex of berries) against damage caused by UV radiation and cigarette smoke in cultured human keratinocytes and fibroblasts by quantifying the AhR receptor, NF-κB (nuclear factor kappa B), HSP-47 (heat shock protein 47), malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase, catalase, and total glutathione. The results allow us to infer that the antioxidant skin care product exerts a protective effect against oxidative stress by mechanisms that involve the capture and neutralization of free radicals, thereby conserving the consumption of the antioxidant enzymes catalase, superoxide dismutase, and glutathione, as well as reducing lipid peroxidation. In parallel, the investigational product has a protective role against the deleterious effects of xenobiotic pollutants, as it protected the nuclear translocation of the AhR receptor and presented an anti-inflammatory effect by reducing the production of NF-κB and a decrease in HSP-47 shock protein, indicating a possible protective role of the dermis against damage caused by oxidative stress. These findings demonstrate that the antioxidant skin care product can help reduce and mitigate the issues and signs of skin aging produced by constant exposure to exogenous agents, particularly cigarette smoke and ultraviolet radiation.

30º Congresso Brasileiro de Cosmetologia, São Paulo, 23-25 Maio 2017 Antônio Carlos Vanzo Junior, Liliana Bechelli de Oliveira Torloni, Renan Lage, Andréia Feital da Costa Pereira, Maurizio Mercuri, Sheila Gomes da Silva, Amanda Francielli Pereira, Ana Lúcia Tabarini Alves Pinheiro, Michelle Sabrina da Silva, Gustavo Facchini, Samara Eberlin. A busca por substâncias que possam retardar ou reverter o processo de envelhecimento cutâneo é uma ferramenta constante de pesquisa e desenvolvimento na área cosmética e dermatológica. Uma estratégia para o desenvolvimento de produtos mais robustos capazes de prevenir o estresse oxidativo envolve a utilização de substâncias antioxidantes que evitem o desequilíbrio redox e mantenham a homeostase celular, contendo a progressão das reações em cadeia que oxidam substratos orgânicos. A fumaça do cigarro contém mais de 4000 compostos tóxicos, incluindo muitos hidrocarbonetos aromáticos policíclicos (HAP), dioxinas e furanos que exercem efeitos prejudiciais sobre a pele, podendo resultar desde alterações inestéticas, como perda de elasticidade e firmeza, até desordens patológicas, como má cicatrização de feridas, carcinoma de células escamosas, melanoma, cancro oral, acne, psoríase, eczema e alopecia. Considerando o impacto negativo da poluição sobre as características essenciais da pele (uniformidade, sustentação, elasticidade), o presente estudo teve por objetivo avaliar a eficácia pré-clínica de um Complexo Dermocosmético na atividade antienvelhecimento em cultura de queratinócitos humanos expostos ou não à fumaça de cigarro. Para isso, queratinócitos humanos foram incubados com 3 concentrações não citotóxicas do produto dermocosmético por 48 horas e expostos à fumaça de cigarro, para posterior mensuração da peroxidação lipídica, através da quantificação de malondialdeído, das enzimas antioxidantes catalase e superóxido dismutase e do receptor AhR. Os resultados obtidos revelaram que o Complexo Dermocosmético exerce um efeito protetor contra o estresse oxidativo por mecanismos que envolvem a prevenção do consumo das enzimas antioxidantes catalase e superóxido dismutase, além de reduzir a peroxidação lipídica. Paralelamente, o Complexo Dermocosmético demonstrou um papel protetor contra os efeitos deletérios dos poluentes xenobióticos, uma vez que protegeu a translocação nuclear do receptor AhR. Esses achados demonstram que o Complexo Dermocosmético estudado pode ajudar a diminuir e atenuar os aspectos e os sinais do envelhecimento cutâneo produzido pela exposição constante à poluição, em particular, à fumaça de cigarro.

30º Congresso Brasileiro de Cosmetologia, São Paulo, 23-25 Maio 2017 - Palestra Silva, Michelle Sabrina; Facchini, Gustavo; Pinheiro, Ana Lúcia Tabarini Alves; Pinheiro, Adriano Silva; Eberlin, Samara. O envelhecimento capilar é um processo multifatorial influenciado por fatores genéticos e ambientais. Um exemplo clássico de fator ambiental é a radiação ultravioleta (UV), que resulta na indução do estresse oxidativo e produção de radicais livres capazes de causar danos nas organelas celulares presentes no folículo capilar (FC). Estudos recentes evidenciam a existência de um programa de envelhecimento tecidual impulsionado pela proteólise do colágeno tipo XVII (COL17A1) no FC. Esta degradação avança progressivamente, culminando em mudanças na arquitetura do arcabouço capilar. Nosso estudo, pioneiro nesta área, teve por objetivo analisar as consequências da exposição cumulativa à radiação UVA/B no envelhecimento do FC por meio da semiquantificação de COL17A1. Para o desenvolvimento do estudo, utilizamos cultura ex vivo de escalpo proveniente de cirurgia plástica eletiva (ritidoplastia n=3), os quais foram submetidos a 5 doses consecutivas de radiação UVA/B (10 J/cm 2 ), com intervalo de 24 horas entre cada dose. Posteriormente, foi realizada a avaliação por imunofluorescência do COL17A1 nos cortes histológicos obtidos dos fragmentos. Nossos resultados demonstraram que a radiação UV é capaz de acelerar o processo de proteólise do COL17A1 no FC, resultando na miniaturização desse mini-órgão, a qual compromete o desenvolvimento e o crescimento capilar. Nosso estudo demonstrou pela primeira vez na literatura os efeitos nocivos da radiação UVA/B no folículo capilar, contribuindo para o envelhecimento do mini-órgão através da aceleração da proteólise do COL17A1. Estes achados são de suma importância para a indústria cosmética e farmacêutica, que está sempre em busca de novos ativos para proteger e mitigar os efeitos do envelhecimento precoce.

XXIII Congreso Latinoamericano e Ibérico de Químicos Cosméticos, Cancún, Quintana Roo, México, 15-17 Maio 2017 - Apresentação Oral Facchini, Gustavo; Silva, Michelle Sabrina; Pinheiro, Ana Lúcia Tabarini Alves; Pinheiro, Adriano Silva; Eberlin, Samir; Eberlin, Samara. Além da radiação ultravioleta, o fotoenvelhecimento cutâneo vem sendo atribuído à radiação infravermelha A (rIVA), despertando o interesse da comunidade científica em avaliar as alterações estruturais promovidas por essa última na pele. Com o advento da política dos 3R’s (Replace, Refine and Reduce), as experimentações científicas destinadas aos produtos cosméticos ficaram restritas aos ensaios in vitro. Nesse sentido, a utilização de fragmentos de pele provenientes de cirurgia plástica eletiva apresenta-se como um substrato factível para preencher a lacuna mecanística entre os estudos in vitro e clínicos. O objetivo deste trabalho foi comparar os efeitos da rIVA em biópsias obtidas de estudo clínico, cultura de fibroblastos e fragmentos de pele humana, através da quantificação de MMP-1, TIMP-1 e GADD45a com o propósito de validar/confirmar esses efeitos nos três substratos. Avaliou-se também o efeito da rIVA sobre a modulação da expressão gênica em larga escala (transcriptoma) utilizando como substrato fragmentos de pele humana. Voluntários humanos (biópsias), fibroblastos e fragmentos de pele humana foram expostos a rIVA para posterior quantificação proteica de MMP-1, TIMP-1 e GADD45a. Adicionalmente, os fragmentos de pele foram analisados por transcriptoma. Os resultados demonstraram que nos três modelos utilizados, a rIVA induziu aumento de MMP-1, inibiu a síntese de GADD45a e não alterou os níveis de TIMP-1. Adicionalmente, foram identificados pela primeira vez em modelo ex vivo, genes e vias biológicas que podem ser alvos importantes na avaliação de eficácia pré-clínica. Devido à correlação positiva dos três substratos estudados e à identificação de novos marcadores para avaliação de eficácia pré-clínica contra os efeitos da rIVA, pode-se sugerir a utilização do modelo de pele ex vivo por caracterizar-se como uma ferramenta plausível e sustentável para suprir as deficiências entre os conhecimentos gerados a partir de experimentos in vitro e clínicos.

XXIII Congreso Latinoamericano e Ibérico de Químicos Cosméticos, Cancún, Quintana Roo, México, 15-17 de Maio de 2017 Vanzo-Jr, Antônio Carlos; Pereira, Andréia Feital Costa; Torloni, Liliana Bechelli de Oliveira; Lage, Renan; Mercuri, Maurizio; Silva, Sheila Gomes; Pereira, Amanda Francielli; Pinheiro, Ana Lúcia Tabarini Alves; Pinheiro, Adriano Silva; Silva, Michelle Sabrina; Facchini, Gustavo; Eberlin, Samara Estudos demonstram uma estreita relação entre o melasma e o aumento local da expressão de marcadores vasculares como o VEGF (fator de crescimento endotelial vascular) e iNOS (óxido nítrico sintase induzível). Melanócitos exibem receptores funcionais para o VEGF, e essa interação tem sido implicada no aumento da atividade celular. A iNOS induz a liberação de óxido nítrico, que promove um estímulo da tirosinase e da transferência da melanina para o melanossomo. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos antiangiogênicos e clareadores de uma formulação cosmética despigmentante (BL-1) em cultura de células e pele humana. Fibroblastos, queratinócitos e melanócitos humanos, assim como fragmentos de pele humana (obtidos de cirurgia plástica eletiva), foram incubados com BL-1 e expostos à radiação UV ou estresse inflamatório com IL-1α para posterior quantificação proteica de melanina, tirosinase, endotelina-1, PAR-2, VEGF e iNOS. Os fragmentos de pele foram submetidos à avaliação histológica com hematoxilina/eosina associada à técnica de Fontana-Masson para visualização da melanina. Os resultados demonstraram que BL-1 promove uma redução na síntese das proteínas VEGF e iNOS, indicando uma propriedade antiangiogênica. Em relação ao efeito clareador, BL-1 foi capaz de reduzir a produção de melanina em ambos os sistemas testados - cultura de melanócitos e pele humana. A ação despigmentante também foi revelada pela diminuição dos níveis de endotelina-1, PAR-2 e da atividade da tirosinase, quando comparado às culturas expostas somente à radiação UV. Nossos resultados permitem inferir que BL-1 apresenta um efeito antiangiogênico, indicando um papel no componente vascular do melasma. Além disso, a propriedade clareadora observada reforça a utilização de BL-1 na prevenção e tratamento do melasma.

XXIII Congreso Latinoamericano e Ibérico de Químicos Cosméticos, Cancún, Quintana Roo, México, 15-17 Maio 2017 - Apresentação Oral Eberlin, Samara; Pinheiro, Ana Lúcia Tabarini Alves; Pinheiro, Adriano Silva; Silva, Michelle Sabrina; Eberlin, Samir; Facchini, Gustavo. O envelhecimento cutâneo constitui um processo progressivo e degenerativo, acelerado pela exposição crônica à radiação solar e poluição ambiental. A pele envelhecida apresenta inúmeras manchas e rugas profundas que surgem em consequência das alterações fisiopatológicas na pele. Nosso grupo vem conduzindo ensaios laboratoriais que mimetizam o impacto da exposição solar e poluição em modelos experimentais de cultura de células e pele humana. O objetivo deste trabalho é demonstrar os efeitos biológicos nocivos promovidos pela radiação solar e poluição em biomarcadores envolvidos nos mecanismos de citoproteção, melanogênese e metabolismo da derme, utilizando como sistemas teste cultura de células cutâneas e pele humana. Fibroblastos, queratinócitos, melanócitos e fragmentos de pele humana, obtidos de cirurgia plástica eletiva, foram expostos às radiações ultravioleta, infravermelha-A e luz visível, assim como à fumaça de cigarro, para posterior mensuração de biomarcadores, tais como GADD45a, enzimas antioxidantes, NF-κB, receptor Ahr, melanina, colágeno e metaloproteinase tipo 1. A exposição dos sistemas teste às radiações promoveu um aumento da atividade proteolítica da matriz extracelular por meio do aumento da MMP-1 e redução de colágeno total. As radiações também mostraram um desequilíbrio redox por meio da redução na atividade das enzimas catalase, superóxido dismutase, glutationa redutase e diminuição da citoproteção celular. Em relação à fumaça de cigarro, os mecanismos antioxidantes também se mostraram enfraquecidos e a resposta inflamatória aumentada. Nossos resultados corroboram dados da literatura ao demonstrarem os efeitos do envelhecimento extrínseco em consequência de uma resposta inflamatória associada ao desequilíbrio redox, ativação excessiva de proteases de matriz e degradação de colágeno. O desenvolvimento de metodologias pré-clínicas alternativas que mimetizem os danos causados pelo envelhecimento extrínseco é fundamental para a compreensão dos mecanismos biológicos e para o desenvolvimento sustentável de novos produtos para o tratamento estético.

XXIII Congreso Latinoamericano e Ibérico de Químicos Cosméticos, Cancún, Quintana Roo, México, 15-17 Maio 2017 Silva, Michelle Sabrina; Facchini, Gustavo; Pinheiro, Ana Lúcia Tabarini Alves; Pinheiro, Adriano Silva; Eberlin, Samir; Eberlin, Samara. O envelhecimento capilar é um processo multifatorial influenciado por fatores genéticos e ambientais. Um exemplo clássico de fator ambiental é a radiação ultravioleta (UV), que resulta na indução do estresse oxidativo e produção de radicais livres capazes de causar danos nas organelas celulares presentes no folículo capilar (FC). Estudos recentes evidenciam a existência de um programa de envelhecimento tecidual impulsionado pela proteólise do colágeno tipo XVII (COL17A1) no FC. Esta degradação avança progressivamente, culminando em mudanças na arquitetura do arcabouço capilar. Nosso estudo, pioneiro nesta área, teve por objetivo analisar as consequências da exposição cumulativa à radiação UVA/B no envelhecimento do FC por meio da semiquantificação de COL17A1. Para o desenvolvimento do estudo utilizamos cultura ex vivo de escalpo proveniente de cirurgia plástica eletiva (ritidoplastia n=3), os quais foram submetidos a 5 doses consecutivas de radiação UVA/B (10 J/cm 2 ), com intervalo de 24 horas entre cada dose. Posteriormente, foi realizada a avaliação por imunofluorescência do COL17A1 nos cortes histológicos obtidos dos fragmentos. Nossos resultados demonstraram que a radiação UV é capaz de acelerar o processo de proteólise do COL17A1 no FC, resultando na miniaturização desse mini-órgão, a qual compromete o desenvolvimento e o crescimento capilar. Nosso estudo demonstrou pela primeira vez na literatura os efeitos nocivos da radiação UVA/B no folículo capilar, contribuindo para o envelhecimento do mini-órgão através da aceleração da proteólise do COL17A1. Estes achados são de suma importância para a indústria cosmética e farmacêutica, que está sempre em busca de novos ativos para proteger e mitigar os efeitos do envelhecimento precoce.

American Academy of Dermatology Annual Meeting AAD, Orlando-FL, USA. March 3-7, 2017. Antônio Carlos Vanzo Junior, Liliana Bechelli de Oliveira Torloni, Renan Lage, Andréia Feital da Costa Pereira, Maurizio Mercuri, Amanda Francielli Pereira, Ana Lúcia Tabarini Alves Pinheiro, Michelle Sabrina da Silva, Gustavo Facchini, Samara Eberlin Extrinsic cutaneous aging is attributed to changes in the skin due to lifestyle, being influenced mainly by ultraviolet radiation (UV), but also by pollution resulting from smoking, chemicals, heat, and other environmental insults. After exposure to UV radiation, the formation of free radicals occurs, causing cellular damage and triggering an inflammatory response. In addition, cigarette smoke exerts harmful effects on the skin mediated by the aryl hydrocarbon receptor (AhR), a cytosolic transcription factor that binds the toxic agent and translocates to the cell nucleus, where it regulates the transcription of genes involved in oxidative stress, inflammation, immunosuppression, pigmentation, premature aging, and skin cancer. The search for substances that can reduce or reverse the skin aging process is a constant goal in research and development in cosmetics and dermatology. A strategy for developing robust products capable of preventing oxidative stress involves using antioxidants to prevent redox imbalance and maintain cellular homeostasis, thus containing the progression of chain reactions that oxidize organic substrates. The objective of this study was to evaluate the preclinical efficacy of an antioxidant skin care product (nano-tocopherols + resveratrol, nano-omegas 3, 6, and 9, and a standardized complex of berries) against damage caused by UV radiation and cigarette smoke in cultures of human keratinocytes and fibroblasts by quantifying AhR, NF-κB (nuclear factor kappa B), HSP-47 (heat shock protein 47), malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase, catalase, and total glutathione. The results allow us to infer that the antioxidant skin care product exerts a protective effect against oxidative stress through mechanisms involving the capture and neutralization of free radicals, thus conserving the antioxidant enzymes catalase, superoxide dismutase, and glutathione, as well as reducing lipid peroxidation. In parallel, the investigational product has a protective role against the deleterious effects of xenobiotic pollutants, since it protected the nuclear translocation of the AhR receptor and presented an anti-inflammatory effect by reducing NF-κB production and HSP-47 levels, indicating a possible protective role of the dermis against damage caused by oxidative stress. These findings demonstrate that the antioxidant skin care product can help reduce and mitigate the signs of skin aging caused by constant exposure to exogenous agents, particularly cigarette smoke and ultraviolet radiation.

American Academy of Dermatology Annual Meeting AAD, Orlando-FL, USA. March 3-7, 2017. Antônio Carlos Vanzo Junior, Liliana Bechelli de Oliveira Torloni, Renan Lage, Andréia Feital da Costa Pereira, Sheila Gomes da Silva, Amanda Francielli Pereira, Ana Lúcia Tabarini Alves Pinheiro, Michelle Sabrina da Silva, Gustavo Facchini, Samara Eberlin Extrinsic aging is attributed to changes in the skin being influenced mainly by ultraviolet radiation (UV). After exposure to UV-A and UV-B, the formation of free radicals occurs, causing damage to cellular components and triggering an inflammatory response. The cellular redox homeostasis mechanism facilitates the elimination of free radicals through the antioxidant enzymes catalase, superoxide dismutase, and glutathione reductase. The oxidative process leads to decreased synthesis of collagen, elastin, glycosaminoglycans (GAGs), and TGF-β (transforming growth factor beta), which are essential for supporting the tissue. This decrease, associated with increased proteolytic enzymes such as matrix metalloproteinases (MMPs), leads to a breakdown of the extracellular matrix and premature signs of photoaging. Furthermore, prolonged exposure of human skin to UV radiation can result in erythema and edema formation due to the induction of an inflammatory response as a consequence of the release of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and vascular endothelial growth factor (VEGF). In this study, we evaluated the preclinical effectiveness of a new active complex composed of vitamin C nanospheres in the photoaging process using human cultured cells. Fibroblasts and keratinocytes were incubated with three non-cytotoxic concentrations of the new active complex with vitamin C nanospheres and subjected to UV radiation for later quantification of mediators involved in photoaging. Our results showed that the new active complex with vitamin C nanospheres prevents a significant decrease in the levels of collagen, elastin, GAG, TIMP-1, and TIMP-2, which are produced by cells exposed to UV radiation, and protects against UV-induced MMP-1, MMP-9, and MMP-13. Furthermore, the new active complex with vitamin C nanospheres preserves the consumption of superoxide dismutase and prevents the induction of iNOS and VEGF synthesis. These results allow us to infer that the new active complex composed of vitamin C nanospheres has a beneficial effect in preventing the deleterious effects of UV radiation through mechanisms involving restoration and tissue regeneration, antioxidant activity, and reduction of local vasodilation.